產品描述
【獸用名稱】
通用名 豬O型口蹄疫病毒ELISA抗體檢測試劑盒
商品名 無
英文名 ELISA Kit to Detect Antibody against FMD virus
漢語拼音 Zhu O xing Kou ti yi bing du ELISA kang ti jian ce shi ji he
【原理】
本試劑盒是采用豬O型口蹄疫病毒VP1基因工程表達產物包被微孔板，在試驗中，加入稀釋的對照血清和待檢血清，經溫育后，若樣品中含有豬口蹄疫病毒VP1的特異性抗體，則將與檢測板上抗原結合，經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后；再加入酶標二抗，與檢測板上抗原抗體復合物發生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶結合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，加入HF溶液終止反應后，用酶標儀630nm波長測定各反應孔中的OD值。
【作用與用途】
用于檢測豬血清中O型口蹄疫病毒抗體。適用于豬場口蹄疫病毒疫苗免疫狀況的評價以及感染豬的血清學診斷。
【主要成分與含量】
1 抗原包被板 2塊 （96孔/塊）
2 陰性對照血清 （藍色蓋子） 1管 （1ml/管）
3 陽性對照血清 （紅色蓋子） 1管 （1ml/管）
4 羊抗豬酶標二抗（藍色蓋子） 1瓶 （20ml/瓶）
5 20倍濃縮洗滌液（白色蓋子） 1瓶 （30ml/瓶）
6 底物液A （紅色蓋子） 1瓶 （10ml/瓶）
7 底物液B（黑色蓋子） 1瓶 （10ml/瓶）
8 終止液 （藍色蓋子） 1瓶 （10ml/瓶）
9 樣品稀釋液 （黃色蓋子） 1瓶 （50ml/瓶）
10 血清稀釋板 2塊 （96孔/板）
11 說明書 1張
【樣品制備】
取動物全血，按常規方法制備血清，要求血清清亮，無溶血。
【洗滌液配制】
使用前，濃縮的洗滌液應恢復至室溫（25℃左右），并搖動使沉淀的鹽溶解（在37℃水中加熱5~10分鐘），然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋（例如：每板用20ml濃縮液加上380ml水），稀釋好的洗滌液在2~8℃可以存放7天。
【樣品和對照稀釋】
樣品稀釋：在血清稀釋板中按1:32的體積稀釋待檢血清樣品（155μl樣品稀釋液中加5μl待檢血清樣品）。
對照稀釋：在血清稀釋板中按1:4分別稀釋陽性對照和陰性對照（180μl樣品稀釋液中加60μl對照血清）。
【注意事項】
1 試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫，使用后放回2~8℃。
2 不同批號試劑盒的試劑組分不得混用，使用試劑時應防止試劑污染。
3 不要用口移液。
4 底物液B不要暴露于強光，避免接觸氧化劑。
5 未使用的抗原包被板切記不要撕開上面的封口膜。
6 待檢血清樣品數量較多時，應先使用血清稀釋板稀釋完所有要檢測血清，再將稀釋好的血清轉移到檢測板，使反應時間一致。
7 濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋，如果發現有結晶加熱使其溶解后再使用。
8 嚴格按照操作說明書可以獲得的結果。
【用法與判定】
1 取抗原包被板（根據樣品多少，可拆開分次使用），每孔加入稀釋好的洗滌液200μl,靜置3分鐘倒掉液體，并在吸水紙上拍干，共計洗板2次。再分別將稀釋好的待檢血清和對照各取100μl加入到抗原包被板孔中，待檢樣品做1孔，陰性對照和陽性對照各設2孔，每孔100μl.輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30分鐘。
2 甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀釋好的洗滌液200μl,靜置3分鐘倒掉，再在吸水紙上拍干，共計洗滌5次，
3 每孔加羊抗豬酶標二抗100μl,置37℃溫育30分鐘。
4 洗滌5次， 方法同2.切記每次在干凈吸水紙上拍干。
5 每孔先加底物液A一滴（50?l）、再加底物液B一滴（50?l），混勻，室溫（18℃~25℃）避光顯色10分鐘。
6 每孔加終止液一滴（50μl），10分鐘內測定結果（測定前在震蕩器上輕輕震動一下）。
【結果判定】
在酶標儀上測各孔的OD630nm值。試驗成立的條件是陽性對照孔的平均OD630nm值均≥0.8,陰性對照孔的平均OD630nm值均<0.3.
樣品OD630nm值≥0.4時判為陽性；樣品OD630nm值<0.4時判為陰性。
注意：用620~650納米波長測定結果均有效。
間接血凝試驗（HIA）和酶聯免疫吸附試驗（ELISA）結果對比分析
間接血凝試驗（HIA） 小于1:128 1:128~1:256 1:512~1:2048 大于1:2048
酶聯免疫吸附試驗（ELISA） 小于0.40 0.40~0.70 0.70~1.20 大于1.20
注：以上結果僅供參考。
【貯 存】 2~8℃避光保存
【有 效 期】 10個月
【生產企業】 武漢科前動物生物制品有限責任公司